培养基的灭菌及影响因素

发布时间:2012-5-9 13:14
灭菌方式 分批灭菌:适于规模小的工厂和种子罐。是指培养基在发酵罐中用蒸气加热,达到预定温度且维持一定时间后,从夹套或蛇管通冷却水,迅速将培养基冷却,并通入无菌空气保压,至接近发酵温度,然后接种。这种方法不需其它设备,操作简易,其缺点是加热和冷却所需时间较长;相对地说是延长发酵周期,使发酵罐的利用率降低。所以,大型发酵罐采用这种方法,不甚合理,尤其发酵罐本身的 夹套或蛇管传热面积有限,做不到高温度短时间的原则。 连续灭菌:适于大规模工厂,将培养基在发酵罐外连续不断进行加热,维持和冷却,最后进入发酵罐。它有很多优点如:
①可以采用高温短时间灭菌,物料、受热时间短,减少营养成分的破坏,有利于提高生产效率。
②总的灭菌时间较分批灭菌大为减少,缩短发酵罐的生产周期。
③蒸气负荷均衡,提高锅炉效率。
④适应自动控制。
连续灭菌的缺点是容易产生泡沫,粘度大或颗粒物料的培养基会造成局部灭菌不充分与管道堵塞现象。
影响培养基灭菌的几个因素①培养基中污染菌的数量与灭菌时间的关系。
②培养基pH的影响:在pH 6.0~8.0时,微生物最耐热,不易死亡,pH<6.0时,氢离子易渗入微生物细胞内,改变细胞的生理状态,促使其死亡,所以培养基的pH越低,所需的灭菌时间也越短。
③培养基成分的影响:培养基中所含一定浓度的糖类、油脂及蛋白质,会增加微生物的耐热性。高浓度的有机物增加培养基的粘度,影响热的传入,应提高灭菌温度。而高浓度的盐类增加渗透压,可以促进热的传导,降低微生物的耐热性,故易于灭菌。 ④培养基中颗粒的影响:特别是颗粒大和结块的传热效果差,灭菌就较困难,所以灭菌前必须充分搅拌。有时需提高灭菌温度,延长灭菌时间来达到灭菌的要求。 ⑤泡沫的问题:培养基在灭菌时产生泡沫对对灭菌效果有很大的影响,因为泡沫中的空气形成隔热层,空气的导热差,包裹在泡沫中的微生物就不容易被杀死(达不到受热温度)。因此,灭菌操作中要注意泡沫的产生,如果不要时,可以再发酵的过程添加发酵消泡剂,起到消泡的作用,还要防止压力骤降而起泡。 本文参考《发酵微生物学》一书。
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