培养基的灭菌及影响因素

发布时间：2012-5-9 13:14

灭菌方式分批灭菌：适于规模小的工厂和种子罐。是指培养基在发酵罐中用蒸气加热，达到预定温度且维持一定时间后，从夹套或蛇管通冷却水，迅速将培养基冷却，并通入无菌空气保压，至接近发酵温度，然后接种。这种方法不需其它设备，操作简易，其缺点是加热和冷却所需时间较长；相对地说是延长发酵周期，使发酵罐的利用率降低。所以，大型发酵罐采用这种方法，不甚合理，尤其发酵罐本身的夹套或蛇管传热面积有限，做不到高温度短时间的原则。连续灭菌：适于大规模工厂，将培养基在发酵罐外连续不断进行加热，维持和冷却，最后进入发酵罐。它有很多优点如：
①可以采用高温短时间灭菌，物料、受热时间短，减少营养成分的破坏，有利于提高生产效率。
②总的灭菌时间较分批灭菌大为减少，缩短发酵罐的生产周期。
③蒸气负荷均衡，提高锅炉效率。
④适应自动控制。
连续灭菌的缺点是容易产生泡沫，粘度大或颗粒物料的培养基会造成局部灭菌不充分与管道堵塞现象。影响培养基灭菌的几个因素①培养基中污染菌的数量与灭菌时间的关系。
②培养基pH的影响：在pH 6.0～8.0时，微生物最耐热，不易死亡，pH<6.0时，氢离子易渗入微生物细胞内，改变细胞的生理状态，促使其死亡，所以培养基的pH越低，所需的灭菌时间也越短。
③培养基成分的影响：培养基中所含一定浓度的糖类、油脂及蛋白质，会增加微生物的耐热性。高浓度的有机物增加培养基的粘度，影响热的传入，应提高灭菌温度。而高浓度的盐类增加渗透压，可以促进热的传导，降低微生物的耐热性，故易于灭菌。 ④培养基中颗粒的影响：特别是颗粒大和结块的传热效果差，灭菌就较困难，所以灭菌前必须充分搅拌。有时需提高灭菌温度，延长灭菌时间来达到灭菌的要求。 ⑤泡沫的问题：培养基在灭菌时产生泡沫对对灭菌效果有很大的影响，因为泡沫中的空气形成隔热层，空气的导热差，包裹在泡沫中的微生物就不容易被杀死（达不到受热温度）。因此，灭菌操作中要注意泡沫的产生，如果不要时，可以再发酵的过程添加发酵消泡剂，起到消泡的作用，还要防止压力骤降而起泡。本文参考《发酵微生物学》一书。

常见问题